Укажите методы лабораторной диагностики краснухи

Эффективность любого лечения и прогноз для здоровья больного человека зависят от правильности постановки диагноза. Диагностика имеет огромное значение в современной медицинской практике. Диагноз того или иного заболевания ставится на основании данных анамнеза болезни, клинических симптомов, результатов внешнего осмотра. Наиболее информативны лабораторные и инструментальные методы диагностики. Диагностика краснухи не является исключением. Чтобы назначить адекватную терапию, врач должен назначить определенные анализы.

Наибольшее значение в данной ситуации имеют исследование крови и анамнез заболевания. По одним внешним проявлениям трудно поставить окончательный диагноз. Цель диагностики краснухи — выявить специфические антитела в крови, которые указывают на возбудителя инфекции. Исследование крови на краснуху очень важно у беременных женщин, так как при тяжелом течении заболевания может пострадать плод. В этом случае могут развиться врожденные дефекты. Рассмотрим более подробно основные методы исследования больного человека при подозрении на краснуху.

Что представляет собой краснуха?

Краснуха — это вирусное заболевание, характеризующееся появлением на теле сыпи, воспалением верхних отделов дыхательных путей и незначительной интоксикацией организма. В большинстве случаев данная патология поражает детей, но может возникать и у взрослых, например, в период вынашивания ребенка. Первое описание этой болезни относится к 18 веку. Течение краснухи не представляет большой угрозы для жизни больного человека, но оно опасно в период беременности для плода. В настоящее время проводится вакцинация против краснухи среди женщин и детей, что в значительной степени снижает риск заболеть.

Краснуха может передаваться от больного человека здоровому. Основной путь передачи вируса — воздушно-капельный. При этом источником могут быть дети. Второй механизм — вертикальный (через плаценту от матери к ребенку). Большое значение имеет тот факт, что потенциально опасными для окружающих являются больные острой и стертой формой заболевания. Предрасполагающим фактором развития краснухи является скученность коллективов.

Диагностика заболевания

Определение наличия или отсутствия у человека краснухи проводится комплексно. В первую очередь врач проводит опрос пациента и внешний осмотр. Большое диагностическое значение имеют жалобы человека. При наличии краснухи клинические симптомы начинают проявляться не сразу. Инкубационный период составляет 2-3 недели (до 23 дней). Немаловажно то, что выделение вируса возможно за 5 дней до появления сыпи, когда еще человек чувствует себя вполне здоровым. Вслед за инкубационным следует продромальный период, но он может отсутствовать. Диагностика в этот период затруднена, так как больного могут беспокоить только умеренные катаральные явления и повышение температуры тела.

Диагностика в период высыпаний является наиболее информативной. Сыпь продолжается около 3-7 дней. Она может локализоваться на всей поверхности тела, но чаще всего она определяется на разгибательных поверхностях, ягодицах, спине и лице. Сыпь мелкая представлена пятнышками. Элементы сыпи располагаются отдельно друг от друга и редко сливаются. Появление данного симптома связано с распространением вируса по кровеносным сосудам. В этот период можно проводить анализ крови на краснуху. К дополнительным симптомам краснухи относится боль в суставах, повышение температуры тела.

Что же касается диагностики врожденной краснухи у детей, то наибольшее значение имеют следующие 3 признака:

  • нарушение слуха;
  • помутнение хрусталика;
  • пороки сердца.

Проводя диагностику, врач должен обратить внимание на то, что сыпь появляется внезапно и в один момент. Немаловажное значение имеет и эпидемическая обстановка на данной территории. Диагностика на основании клинических проявлений не может дать полное представление о заболевании. Существует много болезней со схожими проявлениями, например, ветряная оспа, корь, скарлатина и некоторые другие. Наиболее надежным является анализ на антитела к краснухе.

Серодиагностика краснухи

Исследование крови на краснуху является наиболее достоверным методом. При этом может использоваться как вирусологическое исследование, так и определение титра антител к вирусу. Расшифровка результатов должна проводиться опытным врачом. Серодиагностика предполагает проведение следующих реакций: РСК, РТГА, РИФ или ИФА. При этом используются парные сыворотки. Необходимый интервал составляет 10 дней. Большую диагностическую ценность имеют специфические антитела, представленные иммуноглобулинами класса M и G. При этом по мере развития заболевания титр их увеличивается.

Для выявления IgM нужно соблюдать определенные сроки. Исследование должно осуществляться не позднее чем через 12 суток после заражения. Расшифровка анализа такова, что при повторном исследовании сыворотки пациента повышение титра антител в 4 и более раза свидетельствует о наличии краснухи. Важно, что исследование сыворотки крови на антитела проводится и с профилактической целью. Делается это в отношении беременных женщин, имевших контакт с больными людьми. Если при первом анализе выявлены IgG, то это указывает на наличие иммунитета и то, что человек в недавнем прошлом перенес краснуху. Нужно помнить, что у больных, переболевших этой болезнью, формируется стойкий иммунитет.

Важно знать, что IgG появляются в крови на несколько дней позже, нежели IgM. Максимальная его концентрация определяется через месяц с начала заболевания. Интересно то, что IgG сохраняются в течение всей жизни, они отвечают за специфический иммунитет в отношении вируса краснухи. IgM обнаруживаются в высоких концентрациях на 2-3 неделе инфекционного процесса. Они циркулируют в крови недолго и примерно через месяц полностью исчезают.

Вирусологические методы диагностики

Проведение анализа на краснуху может предполагать обнаружение самого возбудителя заболевания (вируса). Это наиболее информативный метод. Его недостаток в том, что выявить вирус в крови можно только в определенный период заболевания. Наиболее подходящее время для этого 7-14 день от начала заражения. Именно в это время вирус начинает циркулировать в крови. Сложность в том, что анализ крови должен делаться до появления сыпи, что очень непросто. Все дело в том, что больные обращаются за медицинской помощью в разгар заболевания, когда вирусологические методы уже малоэффективны.

Проводиться может не только анализ крови, но и фекалий. В ряде случаев (в период высыпаний) можно брать отделяемое из носоглотки для последующего исследования. Анализ крови на определение возбудителя очень часто используется для подтверждения внутриутробной краснухи. В данной ситуации возбудитель отлично выделяется из плаценты и других органов плода. Это касается и детей в возрасте до 1 месяца. Чтобы определить наличие или отсутствие краснухи у плода, исследуются околоплодные воды, кровь из пуповины. Если анализ на антитела — это косвенный метод диагностики, то вирусологический способ позволяет с точностью поставить верный диагноз.

На сегодняшний день самым надежным и распространенным методом обнаружения возбудителя инфекционных заболеваний, в частности краснухи, является полимеразная цепная реакция (ПЦР). С ее помощью можно выделить геном вируса и поставить соответствующий диагноз. Это наиболее специфичный и чувствительный тест. Несмотря на все это, у него есть один недостаток — высокая стоимость.

Дифференциальная диагностика

Расшифровка всех анализов позволяет сделать заключение о наличии или отсутствии заболевания. Тем не менее врач обязан исключить другую патологию, схожую по клиническим проявлениям и течению с краснухой. Дифференциальная диагностика предполагает исключение такой патологии, как корь, псевдотуберкулеза, экзантемы, скарлатины и некоторых других. При кори симптомы аналогичны: сыпь, поражение дыхательных путей, повышение температуры. Отличие в том, что лихорадка более выраженная, сыпь формируется на кожных покровах постепенно (в несколько этапов). Она появляется уже на 4-5 день с момента заражения.

Характер сыпи несколько иной. Она пятнисто-папулезная. Элементы сыпи могут сливаться между собой, образуя небольшие скопления. Кроме того, корь протекает более тяжело. Больных беспокоит сильный кашель, слезотечение или склерит. Могут увеличиваться лимфатические узлы. Краснуху можно спутать с инфекционным мононуклеозом. При нем сыпь в большинстве случаев образуется на фоне приема ампициллина. Возникает она на 2-3 сутки. При мононуклеозе часто поражается печень. Может развиться острый тонзиллит. Расшифровка анализа крови выявляет лейкоцитоз. Кроме того, анализ крови позволяет обнаружить специфический для данной болезни признак — мононуклеары.

Заключение, выводы, рекомендации

Таким образом, краснуха при неосложненном течении не представляет большой опасности для человека. Тем не менее есть риск тератогенного воздействия на плод у беременных женщин. Чтобы избежать тяжелых дефектов в развитии, требуется своевременно проводить исследование на вирус краснухи. Расшифровка анализа позволяет поставить правильный диагноз. Важно, что в настоящее время отсутствует специфическая терапия данного инфекционного заболевания. При выявлении серонегативных девочек в подростковом возрасте рекомендуется проводить вакцинацию.

Диагностика инфекции может включать в себя исследование крови с целью определения генома возбудителя или антител к вирусу краснухи. Наибольшее значение имеет обнаружение высоких концентраций IgM в сыворотке крови. Немаловажное значение имеет и дифференциальная диагностика, которая осуществляется для исключения другой патологии. В целях профилактики необходимо избегать контакта в больными людьми и своевременно вакцинироваться.

Краснуха (Rubella) – острая вирусная болезнь, характеризующаяся мелкопятнистой экзантемой, генерализованной лимфаденопатией, умеренно выраженной лихорадкой. Возбудитель – РНК-содержащий вирус, принадлежит к семейству Togaviridae рода Rubivirus. Вирус краснухи обладает тропизмом к эмбриональной ткани, повреждает генетический аппарат клеток, подавляет митоз отдельных клеточных популяций эмбриона и, возможно, оказывает прямое цитопатогенное действие, что значительно нарушает развитие плода.

Краснуха – строгий антропоноз. Источником инфекции является человек с клинически выраженной, атипичной или стертой формой болезни, а также дети с врожденной краснухой, в организме которых вирус может сохраняться в течение нескольких месяцев (до 1,5–2 лет). Наряду с манифестными формами при краснухе встречаются бессимптомные (инаппарантные) формы. Соотношение клинически выраженной краснухи и бессимптомной инфекции у детей составляет 1:1, а у взрослых 1: 2–1: 8. Инаппарантное течение краснухи наблюдается в 5–6 раз чаще, чем клинически выраженное.

До введения в практику активной иммунизации краснуха встречалась в виде эпидемических вспышек с интервалом 6–9 лет. Во время эпидемической вспышки заболевают не только дети, но и взрослые, особенно в организованных коллективах. Иммунизация способствовала резкому снижению заболеваемости. Максимальное число заболеваний регистрируется в апреле–июне. Особую опасность краснуха представляет для беременных вследствие внутриутробной инфекции плода.

Инкубационный период продолжается 15–21 день. Пути передачи: воздушнокапельный, особое значение имеет вертикальный (трансплацентарный) путь передачи краснухи от матери плоду. Больной представляет эпидемическую опасность со второй половины инкубационного периода краснухи, наибольшая заразность приходится на продромальный период и первые дни болезни. Входные ворота – слизистые оболочки верхних дыхательных путей, откуда вирус проникает в ближайшие лимфатические узлы (особенно заднешейные и затылочные), что приводит к их воспалению и увеличению. Больной человек начинает выделять вирус с отделяемым носоглотки за 5 дней до появления сыпи и выделяет 5–7 дней после ее исчезновения. В дальнейшем наступает вирусемия. Гематогенно вирус разносится по всему организму, обладает дерматотропными свойствами, вызывает изменения лимфатических узлов, которые увеличиваются уже в конце инкубационного периода. Попадание вируса в кровь является началом клинических проявлений болезни: лихорадка, катаральные явления (насморк, ангина, конъюнктивит), мелкая пятнисто-папулезная сыпь – экзантема (бледно-розовые или красные пятна, диаметром 2–4 мм без шелушения). Экзантема является характерным проявлением краснухи.

АТ IgM в сыворотке появляются через 1–2 дня после высыпания, через 2–3 недели титр достигает максимального уровня, через 2–3 месяца обычно они исчезают. АТ IgG к вирусу краснухи начинают вырабатываться через 3–4 недели с момента инфицирования с достижением максимального уровня к 8–9 неделе заболевания и выявляются после окончания острого заболевания пожизненно, обеспечивая защиту от повторной инфекции. Однако описаны редкие случаи реинфицирования, которые сопровождаются резким подъемом уровня АТ IgG. После заболевания формируется стойкий пожизненный иммунитет, тогда как после иммунизации у 10 % женщин протективный иммунитет не формируется, в связи с чем целесообразно обследование женщин перед планированием беременности и при наличии показаний для обследования.

Общепринятой классификации клинических форм краснухи нет, но в зависимости от характера инфицирования выделяют приобретенную и врожденную краснуху, которая может протекать в типичной форме и атипично. Атипичная краснуха протекает легко, без экзантемы, она характеризуется легким катаральным воспалением верхних дыхательных путей и умеренно выраженной лимфаденопатией. В таком случае указание на контакт с больным краснухой является основанием для лабораторного обследования.

Приобретенная краснуха протекает циклично в виде острого инфекционного заболевания. У детей заболевание протекает относительно легко. Вначале элементы сыпи появляются на лице и шее, за ушами и на волосистой части головы. В течение суток сыпь распространяется по различным участкам тела без определенной закономерности. Особенно типично расположение сыпи на спине, ягодицах и на разгибательных поверхностях верхних и нижних конечностей. Подошвы и ладони не поражаются. Почти одновременно с распространением сыпь начинает угасать, полностью исчезая за 1–3 дня, не оставляет после себя пигментации. Позже может присоединиться увеличение задне-шейных и затылочных лимфатических узлов, незначительная лихорадка, катар верхних дыхательных путей. В 30% случаев краснуха протекает без сыпи, но лимфаденит присутствует всегда.

У взрослых заболевание обычно протекает значительно тяжелее. Высыпанию могут предшествовать продромальные явления в виде общего недомогания, головной боли, озноба с повышением температуры до 38°С, болей в суставах, насморка, болей в горле и, как правило, системного увеличения лимфоузлов, особенно заднешейных и затылочных. Среди осложнений краснухи нередко встречаются мигрирующие артриты. Они возникают после исчезновения сыпи и чаще наблюдаются у женщин (60%). Эти симптомы могут продолжаться в течение 3–4 дней, иногда дольше. Из других осложнений встречаются отиты, пневмонии, тромбоцитопения, проявляющаяся геморрагической сыпью. Редкими, но очень тяжелыми осложнениями, являются энцефалит и энцефаломиелит (чаще выявляются у взрослых) с высокой летальностью – 20–50%.

Клиническая картина краснухи у беременных женщин не имеет особенностей. Заболевание краснухой может иметь различные последствия: отсутствие воздействия на плод; инфицирование только плаценты, инфицирование плаценты и плода. Неблагоприятное влияние краснушной инфекции на плод проявляется спонтанными абортами (от 10 до 40%), мертворождением (20%), смертью в неонатальном периоде (10–25%).

Частота и степень поражения плода в значительной степени определяется сроком беременности в момент заражения. Чем меньше срок беременности, при котором женщина заболела краснухой, тем чаще и значительнее проявляются тератогенные действия вируса. Наиболее опасен первый триместр беременности, в период органогенеза. Заболевание краснухой на 3–4-й неделе беременности обусловливает врожденные уродства в 60% случаев, на 9–12-й неделе – в 15% и на 13–16-й неделе – в 7% случаев.

Врожденная краснуха. В первые недели беременности поражение эмбриона происходит через кровь матери и хорион во время общей вирусемии беременной. В дальнейшем после формирования плаценты (14 недель беременности и позже) преобладает трансплацентарный характер заражения. Вирус попадает во время вирусемии в плаценту, где размножается, легко преодолевает плацентарный барьер и инфицирует плод. Через кровь матери из межворсинчатого пространства возбудитель проникает в фетальные сосуды, далее в пупочные сосуды и достигает эндокарда, откуда некротические массы, содержащие активный вирус, гематогенным путем разносятся по всему организму, инфицируя различные органы и ткани плода. Одновременно вследствие вирусного поражения эндотелия кровеносных сосудов плаценты нарушается питание плода. Инфекция вызывает нарушения митотической активности, хромосомные изменения, что выражается в отставании в физическом и умственном развитии. Врожденная краснуха может развиться и после бессимптомной (инаппарантной) краснухи у матери. Степень поражения не зависит от степени тяжести заболевания беременной. Описано несколько случаев внутриутробного инфицирования плода у женщин, перенесших краснуху за 6–12 месяцев до зачатия что, очевидно, объясняется необычайно длительным сохранением вирусов в крови матери.

Течение болезни при внутриутробном заражении значительно отличается от обычной краснухи. Синдром врожденной краснухи (Congenital Rubella Syndrom – CRS) зависит от срока инфицирования. Выделяют классический синдром врожденной краснухи, так называемую триаду Грега (катаракта – 75%, пороки сердца – 50%, глухота – 50%). К синдрому врожденной краснухи принято относить: пороки развития сердца – незаращение артериального протока, дефекты межжелудочковой перегородки, стеноз легочного ствола; поражение глаз – помутнение роговицы, катаракта, хориоретинит, микрофтальмия; характерна также микроцефалия, умственная отсталость, глухота. В последующие годы проявлениями этого синдрома дополнительно стали считать тромбоцитопеническую пурпуру, увеличение печени и селезенки, задержку внутриутробного развития, интерстициальную пневмонию, миокардит или некроз миокарда и поражение костей в области метафиза. Перечень этих проявлений стали именовать расширенным синдромом врожденной краснухи. У некоторых детей выявлялись признаки гуморального и клеточного иммунодефицита, в дальнейшем у лиц с врожденной краснухой развивался сахарный диабет или прогрессирующий подострый панэнцефалит.

При инфицировании плода на ранних сроках развития (особенно опасно заражение в первые 8 недель беременности – в критическую фазу органогенеза) возникают множественные аномалии, являющиеся следствием течения инфекции. Повреждаются сердце, органы слуха, зрения, кости черепа, конечностей. Среди таких младенцев отмечается очень высокий процент перинатальной смертности. Наиболее частыми видами врожденных аномалий вследствие заражения женщины после первого триместра беременности являются глухота (70–90%) и ретинопатия. Несколько реже встречаются гепатомегалия и спленомегалия, геморрагический синдром, гепатит, пневмония. Инфицированные краснухой дети, даже не имеющие пороков развития, часто рождаются с малой массой тела и малым ростом, в дальнейшем отстают в физическом развитии.

При развитии внутриутробной инфекции у ребенка продуцируются специфические АТ IgM, которые сохраняются и в постнатальном периоде (до 6 месяцев), с постепенным появлением собственных АТ IgG. Одновременно у ребенка выявляются АТ IgG, полученные от матери, которые исчезают через несколько месяцев. После родов вирус обнаруживается в плаценте. У больных новорожденных он может обнаруживаться в носоглотке, слюне, моче, кале и выделяться на протяжении 1–2 лет.

Показания к обследованию

  • Планирование беременности;
  • наличие отягощенного акушерского анамнеза (перинатальные потери, рождение ребенка с врожденными пороками развития);
  • беременность (в первую очередь с УЗИ-признаками внутриутробной инфекции, аномалиями развития);
  • женщины при рождении ребенка с врожденными пороками развития;
  • дети при наличии симптоматики врожденной инфекции, врожденных пороков развития;
  • дети, матери которых входят в группу риска по внутриутробной передаче вируса краснухи;
  • наличие экзантемы или «краснухоподобной» сыпи;
  • установленный или предполагаемый контакт с больным краснухой;
  • тромбоцитопения.

Дифференциальная диагностика. При наличии мелкопятнистой экзантемы – аденовирусные и энтеровирусные заболевания, корь, инфекционный мононуклеоз, розовый лишай, лекарственная экзантема, инфекционная эритема; при тромбоцитопении – парвовирусная инфекция В19.

Этиологическая лабораторная диагностика включает выявление вируса в культуре клеток, обнаружение его РНК, определение специфических АТ к АГ вируса краснухи в крови.

Материал для исследования

  • Венозная или пуповинная кровь, слюна, носоглоточные мазки, смывы, соскобы; спинномозговая, амниотическая жидкость, ворсинки хориона, плацента – выделение вируса в культуре клеток, обнаружение его РНК;
  • сыворотка венозной или пуповинной крови – определение АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для выявления вируса краснухи выполняют заражение культуры клеток биоматериалом. Исследование проводят только в специализированных вирусологических лабораториях, длительность – 4–5 дней.

Для выявления РНК вируса краснухи преимущественно используют метод ПЦР. С появлением сыпи РНК вируса в крови и в носоглотке можно обнаружить в течение 7 дней после высыпания. ПЦР-диагностика используется значительно чаще при исследовании отделяемого носоглотки (у контактных лиц), крови, биоптатов, ворсин хориона.

Определение АТ используется для диагностики краснухи, для скрининга в комплексе TоRCH-инфекций и оценки напряженности поствакцинального или противоинфекционного иммунитета. Для ранней диагностики наиболее ценно выявление в сыворотке крови АТ IgМ, которые появляются уже через 1–2 дня после высыпания. Определение авидности специфических АТ IgG к АГ вируса краснухи в крови позволяет оценить сроки инфицирования и дифференцировать острую инфекцию от инфекции, перенесенной в прошлом (от первых дней до 1,5 месяцев и более). Для диагностики первичной инфекции важно определение авидности АТ IgG. Низкоавидные АТ свидетельствуют о первичной инфекции, высокоавидные АТ – исключают возможность протекания острого инфекционного процесса в последние 4–6 недель.

При возможности определения только АТ IgG, целесообразно исследование в динамике, при этом нарастание титра АТ IgG в 4 и более раза будет свидетельствовать о текущей инфекции. Нарастание титра АТ при отсутствии выраженной симптоматики может быть единственным доказательством наличия реинфекции или развития инфекции у вакцинированного лица, при дифференциальной диагностике состояний, сходных по клинике с краснухой.

Показания к применению различных лабораторных исследований и особенности интерпретации результатов у разных категорий обследуемых

Скрининг при планировании беременности часто включает выявление АТ IgМ и АТ IgG. При получении положительного результата выявления АТ IgG и отсутствии АТ IgМ принято считать, что женщина имеет иммунитет (поствакцинальный, если она подтверждает наличие этого, либо постинфекционный – указание в анамнезе на перенесенную краснуху, контакт с больным), напряженность которого достаточна для предупреждения развития плацентита и заражения плода вирусом краснухи в случае инфицирования.

При наличии в анамнезе сведений о контакте с больным краснухой в течение последних 3–6 месяцев для исключения (подтверждения) первичной инфекции важное значение имеет выявление низкоавидных АТ IgG, однако следует учитывать, что у вакцинированных лиц в случае заражения не всегда наблюдается низкий индекс авидности АТ IgG. Для установления текущей инфекции, при наличии сыпи или установленного или предполагаемого контакта с больным краснухой, определяют нарастание титра АТ IgG в динамике, целесообразно дополнительно провести исследования для обнаружения вируса или его РНК.

Скрининг беременных женщин включает выявление АТ IgМ и АТ IgG к вирусу краснухи в крови.

Отсутствие АТ IgМ и АТ IgG у женщины в первом триместре беременности свидетельствует об отсутствии инфицирования, в этом случае исследование повторяют во втором триместре беременности (до 20 недель). При отрицательных результатах двух исследований дальнейший мониторинг не проводится, если нет иных показаний для обследования (контакт с пациентом, имеющим краснуху либо подозрение на нее; наличие сыпи).

Наличие АТ IgМ и отсутствие АТ IgG вв любые сроки беременности чаще свидетельствует в пользу заражения, однако следует исключить ложноположительный результат исследования. Для этого целесообразно определение АТ IgМ к отдельным белкам вируса краснухи с использованием иммуноблота и анализа на вирус краснухи методом ПЦР (обнаружение РНК вируса). Наличие РНК вируса свидетельствует о виремии и подтверждает диагноз краснухи. Также целесообразно исследовать сыворотку крови в динамике через 7–10 дней: повторное выявление АТ IgМ и появление АТ IgG или достоверное (в 4 раза) нарастание концентрации (титра) АТ IgG будет свидетельствовать в пользу текущей инфекции.

Отсутствие АТ IgМ и присутствие АТ IgG – для исключения (подтверждения) первичной инфекции важное значение имеет выявление низкоавидных АТ IgG. В таком случае следует учитывать указание на вакцинацию против краснухи или контакт с больным краснухой либо подозрением на неё. Однако у вакцинированных женщин в случае заражения диагностическое значение данного теста снижено (не всегда наблюдается низкий индекс авидности). Для установления текущей инфекции определяют нарастание титра АТ IgG в динамике.

При возникновении у беременной заболевания, сходного с краснухой, или в случае контакта с больным, женщину необходимо обследовать в кратчайшие сроки. Сложной задачей является распознавание инаппарантной краснухи. Единственным способом выявления бессимптомных форм является лабораторная диагностика – обнаружение вируса или РНК вируса краснухи, АТ IgM и нарастание титра АТ IgG к вирусу краснухи в крови.

При интерпретации результатов лабораторных исследований следует учитывать следующие факторы:

  • инкубационный период – с момента контакта до появления сыпи или обнаружения АТ – составляет 14–21 день;
  • длительное наложение жгута при взятии крови и плохо перемешанная проба крови приводят к получению неверных результатов

При оценке результата определения специфических АТ к вирусу краснухи в крови следует учитывать иммунизацию женщины до беременности.

Интерпретация результатов лабораторного исследований в течение первых 10 дней от первого дня контакта или 4–5 дней от начала заболевания:

  • В крови отсутствует РНК вируса краснухи и(или) АТ IgМ и присутствуют АТ IgG – высока вероятность, что женщина перенесла краснуху в прошлом либо вакцинирована. Контакт с больным угрозу для плода не представляет. Однако для исключения лабораторной ошибки обследование желательно повторить через 7–10 дней. Отсутствие у беременной краснухи – повторное получение таких же результатов (при условии отсутствия нарастания титра IgG). Наличие у беременной краснухи – при повторном обследовании выявлены АТ IgМ, произошло нарастание титра АТ IgG или появились низкоавидные АТ IgG. В качестве подтверждения целесообразно исследовать кровь на наличие РНК вируса, положительный результат свидетельствует о виремии.;
  • В крови не выявлены АТ IgМ и АТ IgG – следует провести исследование биоматериала для выявления вируса или его РНК. Положительные результаты обнаружения вируса или его РНК подтверждают диагноз краснухи, отрицательные – исключают его. Также рекомендуется провести контрольное исследование крови через 7–10 дней – обнаружение АТ IgМ к вирусу краснухи в крови, повторный положительный результат дает основание для вывода о наличии краснухи. Для исключения ложноположительных результатов исследования целесообразно определение АТ IgМ к отдельным белкам вируса краснухи с использованием иммуноблота.

Лабораторная диагностика краснухи у плода актуальна только при развитии заболевания у беременной в первые 17–20 недель гестации и целесообразна лишь в сомнительных случаях или при доказательстве реинфекции вирусом краснухи. Для пренатальной диагностики применяют обнаружение вируса в культуре клеток или выявление РНК вируса методом ПЦР в амниотической жидкости, в биоптатах ворсин хориона и плаценте, крови плода, полученной при кордоцентезе.

Лабораторная диагностика краснухи у новорожденных включает определения АТ IgМ в пуповинной крови и крови новорожденного. Обнаружение РНК вируса в ткани плаценты повышает вероятность заражения ребенка, но его отсутствие не исключает диагноза и требует обследование ребенка для выявления РНК вируса и/или специфических АТ. Отсутствие АТ в неонатальный период свидетельствует об исключении диагноза врожденной краснухи, однако в случае иммунологической толерантности результат может быть ложноотрицательным. Целесообразны дополнительные исследования биоматериала для обнаружения вируса в культуре клеток или РНК вируса методом ПЦР. Последующее обследование детей до 1 года жизни включает определение АТ IgM и IgG. Обнаружение IgG указывает на высокую вероятность врожденной инфекции.

Критерии врожденной инфекции:

  • выделение вируса или его РНК из содержимого носоглотки, мочи, СМЖ в первые три месяца жизни;
  • выявление АТ IgM из крови пуповины вскоре после рождения;
  • наличие АТ к краснухе в возрасте до 6 месяцев, особенно на фоне соответствующих клинических проявлений, так как свежеприобретенная инфекция в раннем детском возрасте не встречается.

Изображение с сайта lori.ru

Дифференциальная диагностика краснухи нацелена на разграничение этого заболевания с корью, скарлатиной, болезнями, вызванными энтеровирусами, аллергической экзантемой.

Краснуха характеризуется умеренным или отсутствующим катаральным периодом. Выявляются увеличенные, болезненные лимфоузлы, в особенности затылочные и заднешейные. Сыпь появляется в первые сутки заболевания, распространяется по телу очень быстро, может обнаруживаться на разных участках. Для краснухи типичны высыпания на спине, ягодицах, руках и ногах. Если человек заболевает во взрослом возрасте, сыпь у него может вообще отсутствовать или принимать форму сливной, а это значительно осложняет диагностику.

Поскольку внутриутробное заражение несет большую опасность плоду, особое внимание уделяется беременным. Если беременная женщина контактировала с человеком, больным краснухой, врач обязан заподозрить заболевание при самых незначительных симптомах, появившихся c 15 по 21-й день после контакта.

Лабораторные методы диагностики краснухи

Анализ крови при краснухе показывает повышенный показатель СОЭ, снижение числа лейкоцитов, лимфоцитов. У взрослых пациентов в крови могут быть выявлены плазматические клетки. Состав крови при заражении краснухой значительно варьируется в зависимости от возраста пациента и тяжести болезни.

Для диагностики краснухи используют серологические методы: реакцию торможения гемагглютинации, РСК, радиоимунный анализ, ИФА в парных сыворотках с промежутком более десяти суток. Результаты этих исследований нужны лишь для ретроспективной диагностики. Рекомендуется выявлять содержание противовирусных иммуноглобулинов. Беременным назначают перечисленные анализы, а также анализ на реакцию бласттрансформации лимфоцитов, чтобы выявить факт заражения матери и плода. Первый раз исследование беременной женщины, побывавшей в контакте с больным краснухой, необходимо провести как можно раньше, но не позже двенадцати суток после контакта. Определение антител к вирусу краснухи (главным образом, IgG) свидетельствует о том, что пациентка раньше уже перенесла болезнь, и беременность может быть сохранена. Если в первой пробе антител не обнаруживается, а в повторной они появляются, это говорит о заражении и большом риске для плода.

Главная / Новости / Лабораторная диагностика краснухи

Лабораторные методы, применяемые для диагностики краснухи, принято делить на прямые и непрямые. Прямые методы позволяют обнаружить в клиническом материале вирус, вирусные антигены или вирусную РНК.

Непрямые методы подразумевают определение болезнетворного агента по реакции макроорганизма, а именно по способности иммунной системы человека образовывать в ответ на инфицирование специфичные антитела. Это так называемые серологические методы.

Первым серологическим методом, разработанным и примененным для диагностики краснухи, стала реакция нейтрализации (РН). Метод основан на способности специфических антител связывать вирус, вследствие чего в чувствительной клеточной культуре не развивается цитопатогенное действие вируса. В настоящее время РН используется для подтверждения подлинности вируса.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА), более простая в выполнении, чем РН, была предложена G.L.Stewart с коллегами. Она основана на задержке гемагглютинирующего действия АГ специфической сывороткой. Диагноз требует исследования двух сывороток крови и подтверждается в случае 4-кратного и более нарастания титра АГА в парных сыворотках, взятых с интервалом в две недели, причем первую сыворотку крови больного надо отбирать не позднее 10 дня с момента контакта с больным острой краснухой. РТГА можно использовать для диагностики, изучения популяционного иммунитета, а также в качестве референс-теста при разработке других диагностических препаратов. Так же, как РН, РТГА до сих пор является «золотым стандартом» лабораторной диагностики краснухи.

Наиболее чувствительным, специфичным, простым в исполнении является иммуноферментный анализ (ИФА), который позволяет получать результат в течение дня и не требует исследования парных сывороток. Как и РТГА, ИФА признан «золотым стандартом». Его чувствительность и специфичность составляют 99,2 и 100% соответственно. Метод имеет множество модификаций, в частности применяются разные схемы добавления компонентов при постановке реакции, например непрямая ИФА (на подложке АГ краснухи). Наиболее рекомендуемой является вариация «с захватом IgM». В этом случае на подложке – АТ против IgM человека, а реагенты добавляются в следующем порядке: испытуемая сыворотка – антитела, конъюгированные с ферментом (субстрат) для выявления метки. Оценивают реакцию по превращению субстрата с помощью спектрофотометра. Метод позволяет выявлять антитела классов IgM и IgG, и, кроме того, оценивать авидность IgG-антител. Был разработан метод количественного измерения степени авидности IgG. С этой целью измеряется активность антител по отношению к АГ краснухи до и после обработки денатурирующим составом. Индекс авидности выражается в процентах: 30-40% – показатель низкой авидности, свыше 60% – высокой.

ИФА широко применяется для диагностики как первичной, так и повторной инфекции и популяционного иммунитета. (См. статью: Антипова А.Ю. «Вирус краснухи и его тератогенное действие. Патогенез, клиника, диагностика, профилактика синдрома врожденной краснухи. Часть 3. Диагностика и профилактика краснухи и СВК»).

«Инфекция и иммунитет», 2011, № 3, с. 231 — 242.

Все новости